@MASTERSTHESIS{ 2016:1284059204, title = {Estudo da fração lectínica da apitoxina da abelha Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae)}, year = {2016}, url = "https://tedebc.ufma.br/jspui/handle/tede/tede/3214", abstract = "As peçonhas e venenos animais apresentam grande importância para a biotecnologia, devido sua riqueza de componentes e aplicações biológicas. A apitoxina, peçonha da abelha Apis mellifera L. é um produto que pode ser utilizado como ferramenta farmacológica para o tratamento de doenças como artrite, câncer e combate ao vírus do HIV. As lectinas vêm sendo detectadas como componentes de diversas peçonhas. Lectina é uma classe de proteínas, de origem não imunológica, capaz de se ligar específica, reversível e não covalentemente a carboidratos ou glicoconjugados. O objetivo deste trabalho é Isolar e caracterizar bioquimicamente a fração lectínica da apitoxina da abelha Apis mellifera L. A apitoxina foi adquirida de abelhas criadas em apiários no município de São Bento, Maranhão, com uso de coletor elétrico. O isolamento da fração lectínica foi realizado por meio de cromatografia de bioafinidade em matriz de galactomananas. Em seguida as frações foram analisadas por eletroforese nativa e SDS-PAGE. As frações foram submetidas ao teste de hemaglutinação sobre os tipos sanguíneos A, B, AB e O seguido de teste de inibição por carboidratos (glicose, manose, galactose, sacarose e lactose). O teste de requerimento de cátions divalentes foi realizado utilizando-se EDTA no sistema de hemaglutinação. A fração foi submetida ao teste de estabilidade por aquecimento, onde amostras foram expostas às temperaturas de 40, 50, 60, 70, 80, 90 e 100°C por 30 minutos e subsequentemente foram submetidas à determinação da atividade hemaglutinante. Uma fração lectínica ligante de D-galactose e que reconhece α-galactosídeos foi isolada da apitoxina da abelha Apis mellifera L., representando a porcentagem de 3,2% do peso seco da apitoxina. A análise eletroforética sob condição desnaturante (SDS-PAGE) da fração lectínica revelou três bandas com pesos moleculares de aproximadamente 14, 17 e 19 kDa. Ao ser submetida a uma eletroforese nativa (ausência de SDS), a fração lectínica revelou apenas uma banda no topo do gel, sugerindo que estas bandas sejam subunidades de uma mesma proteína. A atividade hemaglutinante foi observada para os 4 tipos sanguíneos humanos, no entanto, apresentou maior sensibilidade para os eritrócitos do tipo A (2048 U.H./mL). A atividade foi inibida por lactose (150mM) e D-galactose (500mM), apresentando assim especificidade por estes dois carboidratos. O EDTA (MIC = 0,156 mM) também foi capaz de inibir a atividade hemaglutinante, demonstrando que esta fração lectínica é dependente de cátions divalentes. A fração lectínica isolada demonstrou elevada termoestabilidade, sendo capaz de manter sua atividade mesmo após exposição a 70°C por 30 minutos. A apitoxina da abelha africanizada Apis melliferra L. não apresenta relatos anteriores da presença de lectinas.", publisher = {Universidade Federal do Maranhão}, scholl = {PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM SAÚDE E AMBIENTE/CCBS}, note = {DEPARTAMENTO DE PATOLOGIA/CCBS} }