@MASTERSTHESIS{ 2019:665638249, title = {Ação da serinoprotease PIC produzida por escherichia coli sobre proteínas da matriz extracelular e da cascata de coagulação sanguínea}, year = {2019}, url = "https://tedebc.ufma.br/jspui/handle/tede/tede/2650", abstract = "A serinoprotease Pic (protein involved in colonization) é uma proteína autotransportadora identificada em E. coli enteroagregativa (EAEC), Shigella flexneri e Citrobacter rodentium. Dentre os papéis biológicos para Pic já foram descritos hemaglutinação, atividade mucinolítica, degradação do fator V da cascata de coagulação e clivagem de glicoproteínas de superfície de leucócitos, que estão envolvidas no tráfico, migração e inflamação. Nosso grupo de pesquisa já demonstrou a sua atuação no sistema complemento humano o que confere a essas bactérias a capacidade de driblar os mecanismos de defesa do sistema imune inato favorecendo, desta forma, o desenvolvimento e manutenção do quadro de sepse. Devido a essas habilidades, levantou-se a hipótese de que Pic teria ação sobre outras moléculas importantes do hospedeiro como as proteínas envolvidas com a cascata de coagulação sanguínea e moléculas da matriz extracelular. Desta forma, o objetivo deste estudo foi investigar a ação da serinoprotease Pic sobre componentes da matriz extracelular e da cascata de coagulação sanguínea. Para isso, frações concentradas do sobrenadantes de cultura de E. coli produtora de Pic (HB101/Pic) e não produtora de Pic (HB101), bem como BSA foram incubados em diferentes tempos com diversas moléculas da cascata de coagulação sanguínea (plasminogênio, fibrinogênio e fibrina) e da matriz extracelular (colágeno tipo I, colágeno tipo IV, decorina, laminina e fibronectina plasmática) para avaliar tanto uma possível ligação como a degradação destes componentes. Além disto, foi realizado também um ensaio de ativação do plasminogênio em plasmina, uma vez que esta é uma molécula chave na formação de coágulos e na ativação de outras vias do sistema imune. Desta forma, foi possível observar que as frações concentradas do sobrenadantes de cultura de HB101/Pic foi capaz de se ligar a diversas moléculas da matriz extracelular, de maneira significativa, tais como colágenos tipo I e IV, laminina e fibronectina. Ao incubar a proteína Pic com moléculas da coagulação sanguínea foi possível observar ligação com, o plasminogênio, este por sua vez, foi convertido em sua forma ativa, plasmina, na presença do ativador exógeno do tipo uroquinase (uPA). Os demais componentes tanto da cascata como da matriz extracelular não foram clivados por Pic. Acreditamos que a bactéria E. coli produtora de serinoprotease Pic liga-se à matriz extracelular por meio de diversos componentes, facilitando assim o processo infeccioso no hospedeiro. A plasmina gerada na presença de Pic também deve contribuir para um efeito sinérgico na degradação de moléculas do sistema complemento, bem como para ativação desregulada e aumentada da cascata de coagulação sanguínea.", publisher = {Universidade Federal do Maranhão}, scholl = {PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS DA SAÚDE/CCBS}, note = {DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA/CCBS} }