@PHDTHESIS{ 2018:2091588185, title = {Desenvolvimento e aplicação de Elisa indireto com peptídeo sintético p-p27 e ensaios moleculares para o diagnóstico da Leucemia viral felina (FeLV)}, year = {2018}, url = "https://tedebc.ufma.br/jspui/handle/tede/tede/2213", abstract = "O vírus da leucemia felina (FeLV) pertence à família Retroviridae, gênero Gammaretrovirus. A proteína do core viral p27 é produzida em alta quantidade nas células infectadas, sendo encontrada no citoplasma e fluidos corporais. Embora os testes diagnósticos sejam de alta sensibilidade, deve-se realizar mais de um teste para confirmação, principalmente os sorológicos, devido a característica variável do progresso da infecção. Os objetivos desta pesquisa foram desenvolver e padronizar um ELISA indireto utilizando um peptídeo sintético p-p27 baseado no gene gag para o diagnóstico da leucemia viral felina (FeLV) e avaliar co-infecções. Para detecção do antígeno p27 do FeLV e anticorpos para FIV, 80 amostras foram testadas com kit comercial de ensaio imunoenzimático rápido FIV/FeLV Test kit (AlereTM) e confirmados por (ELISA - SNAP® Combo FeLV/FIV). Amostras de fezes foram submetidas a testes para detecção do antígeno da panleucopenia e coronavírus felino utilizando kits comerciais Panleucopenia Felina Ag Test Kit e Coronavirose Felina Ag Test Kit (Alere TM). Para confirmação da presença do DNA proviral foi realizada reação em cadeia da polimerase (PCR) para amplificação de um fragmento alvo de 450, 235 e 166pb do gene gag do FeLV. Os subtipos do FeLV foram identicados por meio da nested-PCR para FeLV-A, B e C. Os resultados mostram que do total de 80 amostras examinadas, 5,0% (4/80) eram positivas para FeLV, 15% (12/80) para FIV, 2,50% (2/80) para coronavirus e 0% (0/80) para panleucopenia. Infecção concomitante (FIV/FeLV) foi observada em 1,25% (1/80) dos animais. Os principais sinais clínicos observados foram: halitose, salivação intensa, gengivoestomatite, faringite, sangramento oral, ulcerações em porção dorsal e lateral da língua, lesões em arco glossopalatino, caquexia, letargia, diarreia e co-infecções (sinais respiratórios), além de alterações reprodutivas (hidrossalpingite e congestão uterina), nefropatia e hepatopatia. A nested PCR revelou que as quatro amostras positivas para FeLV amplificaram para os subtipos A e B, demonstrando uma combinação AB e nenhuma para o subtipo C e/ou ABC. A análise filogenética identificou similaridade (78% de bootstrap) para FeLV-AB, aos subtipos ocorrentes na Ásia oriental (Japão) e sudeste da Ásia (Malaysia), demonstrando ser um subtipo altamente variável geneticamente, caracterizando um subtipo circulante com genótipo diferenciado. O ELISA indireto foi desenvolvido com um peptídeo solúvel linear com 16 resíduos de aminoácidos, o pp27 foi eficiente em detectar anticorpos anti-FeLV em felinos naturalmente infectados, podendo ser uma ferramenta auxiliar no diagnóstico.", publisher = {Universidade Federal do Maranhão}, scholl = {PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM BIOTECNOLOGIA - RENORBIO/CCBS}, note = {DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA/CCBS} }