@PHDTHESIS{ 2020:464364067, title = {Efeito leishmanicida do óleo essencial de Vernonia brasiliana (L.) Druce (Asteraceae) em Leishmania infantum}, year = {2020}, url = "https://tedebc.ufma.br/jspui/handle/tede/tede/3238", abstract = "O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito leishmanicida do óleo essencial de Vernonia brasiliana (VBEO) em formas promastigotas de Leishmania infantum, seu mecanismo de ação e o efeito da sua associação com a droga padrão miltefosina. Folhas de V. brasiliana foram coletadas na cidade de Santa Luzia, Maranhão, seguido de identificação botânica e depósito de exsicata. As folhas foram secas e submetidas ao processo de hidrodestilação, para obtenção do óleo essencial. A composição química do óleo essencial foi determinada por cromatografia gasosa-espectrometria de massas (CG-MS). As quantidades relativas dos compostos isolados foram calculadas a partir das áreas de pico da cromatografia gasosa. A atividade leishmanicida do óleo essencial foi avaliada em formas promastigotas de L. infantum e a citotoxicidade em macrófagos DH82 através do ensaio colorimétrico do MTT. Para identificação de alterações ultraestruturais, formas promastigotas de L. infantum foram tratadas com o IC50 do óleo essencial e avaliadas por microscopia eletrônica de transmissão. Variações no potencial de membrana mitocondrial, na produção de espécies reativas de oxigênio e a análise de eventos apoptóticos foram determinados por citometria de fluxo. Para tal, parasitos tratados com o óleo essencial, na concentração do IC50, foram incubados com os fluorocromos TMRE, H2DCFDA e Anexina/Iodeto de propídio (PI), respectivamente. A combinação entre VBEO-miltefosina foi avaliada em formas promastigotas de L. infantum, pelo método do isobolograma modificado. Diferentes proporções das drogas foram testadas para calcular o índice de concentração inibitória fracionada e determinar a natureza da interação. Os resultados foram analisados estatisticamente pelo teste de Kruskal-Wallis seguido do pós-teste de Dunn. As análises foram realizadas pelo software GraphPad Prism 7, com diferenças consideradas significativas quando p<0,05. O rendimento do óleo essencial foi de 0,1%. Os compostos majoritários do óleo foram sesquiterpenos, sendo o 􀈕-cariofileno (21,47%) o principal deles. Os ensaios de atividade contra formas promastigotas apontaram IC50 de 39,01±1,080 μg/mL. A concentração citotóxica (CC50) foi de 63,13±1,211 μg/mL, mostrando que o óleo é menos tóxico para células do que para os parasitos. A atividade leishmanicida do óleo essencial foi evidenciada através das alterações estruturais visualizadas nas formas promastigotas, como aumento de volume mitocondrial, presença de vesículas na bolsa flagelar, descontinuidade da membrana nuclear, fragmentação e condensação do núcleo e perda de organelas citoplasmáticas. VBEO diminuiu o potencial de membrana mitocondrial, aumentou a produção de espécies reativas de oxigênio em promastigotas de L. infantum, com consequente indução de morte celular por apoptose tardia. A combinação óleo essencial-miltefosina demostrou efeito antagônico, com índice de concentração inibitória fracionária igual a 4,779. Este trabalho demonstra a atividade anti- Leishmania de VBEO contra promastigotas de L. infantum.", publisher = {Universidade Federal do Maranhão}, scholl = {PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM BIOTECNOLOGIA - RENORBIO/CCBS}, note = {COORDENAÇÃO DO CURSO DE BIOLOGIA/CCAA} }